氣態(tài)液氮罐廣泛用于細胞凍配上,如牛精液冷凍的冷源廣泛應用液氮。顆粒精液在經液氮冷卻的氟板(聚四氟乙烯)、銅紗網(wǎng)、鋁板上滴凍。要使承接精液的表面與液氮面連結一定的間隔(1-2厘米)。在滴凍的歷程中,要維持在-80~-120℃的溫度。滴凍前將顛末均衡的精液充實混勻,并查抄精子的活率。滴要敏捷,顆粒要勻稱,每毫升顛末稀釋的精液滴10粒左右為宜。滴凍竣事后,要停頓2-3分鐘,待全部顆粒已凍結立刻投入液氮。經抽樣查抄(一樣通常隨機抽取2粒),解凍活率在0.3以上者,即可裝于紗布袋中,經標志后在液氮中生存。每滴凍完一頭公牛的精液后,必須調換氟板等用具。 現(xiàn)在細管的容量分0.25毫升和0.5毫升兩種,氣態(tài)液氮罐由無毒塑料(聚氯乙烯)制成。管的一端填有棉塞和聚乙烯粉末,粉末遇水即固化主動封口,輸精時又成為推送精液的活塞;另一端在注入精液后,可以聚乙烯粉或鋼珠(或塑料珠)封口,要細致在封口處與精液間留有10-13毫米的空間,防備冷凍歷程中因膨脹引起細管爆裂。
長期以來,科學家們都認為氣態(tài)液氮罐儲存的干細胞(NSCs)是一種具有無限自我更新能力的均質細胞。在進入成體NSC研究領域的時候,一些研究證明NSCs實際上是異質的,不均勻的,它們的自我更新能力,休眠期和命運均不同,這說明NSC亞群在整體NSC干細胞貢獻不同,必須協(xié)調相互的作用。而亞群之間的不平衡也許就會損傷NSC,導致NSC功能衰退。
對氣態(tài)液氮罐儲存干細胞周圍微環(huán)境分子機制作分析,實驗室研究發(fā)現(xiàn)休眠期成體NSCs受控于外在微環(huán)境信號來引導它們的行為,而激活的NSCs和祖細胞則是依賴于內在轉錄和翻譯過程。通過了解不同微環(huán)境因素對特定NSCs亞群的調控深入解析NSCs。